消毒灭菌方法可分为物理方法和化学方法两大类。常用下列术语来表示物理或化学方法杀灭微生物的程度：

灭菌：指杀死或清除物体上一切微生物的过程，包括抵抗力极强的细菌芽孢。

消毒：指用以杀灭物体上病原微生物的方法，但可能残留芽孢或非病原微生物。用于消毒的药物称为消毒剂。

防腐剂：一种防止或抑制体外细菌生长和繁殖的方法。

无菌：即无活菌。防止细菌进入人体或其他物体的操作技术称为无菌操作。

1. 热力灭菌的种类及应用

物理消毒灭菌主要有三种方法：加热、辐射和过滤。超声波、干燥和冷冻也可以杀死和抑制细菌。

热灭菌是利用热能使蛋白质或核酸变性、破坏细胞膜而杀死微生物的，分为干热灭菌和湿热灭菌两大类。

干热灭菌方法有：①焚烧：适用于废弃物品或动物尸体；②烧灼：适用于实验室金属器械（镊子、剪刀、接种环等）、玻璃试管口、瓶口的灭菌；③干烤：在干燥箱中加热至160～170℃，保持2小时，可杀死包括芽孢在内的所有微生物。适用于耐高温玻璃器皿、瓷器、玻璃注射器等；④红外线：常用于碗、筷子等餐具的灭菌；⑤微波：波长为1～的电磁波，能穿透玻璃、塑料薄膜、陶瓷等材质，灭菌效果不可靠，故用于非金属器械、餐具的消毒。

湿热灭菌能在较低温度下达到与干热同样的灭菌效果，其原因在于：①在湿热下，蛋白质吸水后更容易凝固变性；②水分子比空气有更大的穿透力，更容易均匀地传递热能；③蒸汽具有潜热，每克水由气态变为液态能放出529大卡的热能，能使物体的温度迅速升高。常用的湿热灭菌方法有：

1. 巴氏杀菌

61.1-62.8℃加热30分钟，或72℃加热15秒，可杀死乳制品中的链球菌、沙门氏菌、布鲁氏菌等致病菌，但仍能保持热敏性成分的完整，可用于乳制品的消毒。

（二）煮沸法

繁殖体达100%需5分钟以上，芽孢达2小时以上，常用于餐具、刀剪、注射器等消毒。

（三）循环蒸汽灭菌法

使用100℃、1个大气压的蒸汽灭菌，可在15至30分钟内杀死细菌营养体，但不能保证杀死芽孢。

（四）间歇灭菌法

它利用反复循环蒸汽加热来杀死所有微生物，包括孢子。它适用于不能耐高温的含糖或牛奶的培养基。

（五）高压蒸汽灭菌

可杀死包括芽孢在内的一切微生物，是灭菌效果最好、应用最广泛的灭菌方法。方法是将需灭菌的物品放入压力锅内，加热至103.4kPa（1.05kg/cm2）蒸汽压力，温度达121.3℃，维持15～20分钟。适用于普通培养基、生理盐水、手术器械、玻璃容器、注射器、敷料等物品的灭菌。

2.紫外线消毒的原理及应用

常用的射线有紫外线和电离辐射： ①紫外线：波长为200～300纳米的紫外线（包括日光中的紫外线）有杀菌作用，以250～260纳米作用最强。其原理是紫外线能使DNA链上两个相邻的胸腺嘧啶共价结合形成二聚体，阻碍DNA正常转录，使微生物发生突变或死亡。紫外线穿透力弱，一般用于手术室、病房、实验室等空气消毒。紫外线对皮肤、角膜有损伤，应注意防护。

电离辐射包括γ射线、X射线和加速电子，对多种微生物均有杀伤力，细菌繁殖体对辐射的敏感度比孢子高，用于一次性医用塑料制品的批量灭菌。